P·01 Produkte / Immuncheckpoint
Klon TG1 · Kat.-Nr. DIA-TG1-M · RRID AB_3750391
TIGIT wird auf T-Zellen in Tumoren exprimiert. Der ultravalidierte Klon TG1 ermöglicht den Nachweis TIGIT-positiver T-Zellen in menschlichen Tumorgewebeschnitten (FFPE). Der neue Klon TG2 zeigt eine höhere Färbeintensität.
12 klonspezifische peer-reviewte Publikationen
Klon TG1 wurde an zahlreichen Tumorgeweben validiert (IHC-FFPE) und durch verschiedene Labore beta-getestet. Mit dem Antikörperklon TG1 konnte TIGIT erstmals immunhistochemisch in Tumorgeweben nachgewiesen werden.
Vollständige Liste mit DOI und PMID: Publikationen.
Monoklonaler Mausantikörper für die Untersuchung von TIGIT in humanem FFPE-Gewebe. Klon TG1 ist durch zwölf begutachtete Referenzen dokumentiert — von Brightfield-IHC über Färbeautomaten bis zur Fluoreszenz-Multiplex-IHC.
TG1 ist durch zwölf begutachtete Referenzen dokumentiert — u. a. Hodgkin-Lymphom, Seminom, Lungenkarzinom, Gallenblasenkarzinom, kolorektales Karzinom, Melanom, Uveamelanom, kutanes Plattenepithelkarzinom und Merkelzellkarzinom. Drei AACR-Kongressbeiträge zu TIGIT sind in Abschnitt P·12 dokumentiert.
Eine systematische Untersuchung wertete 1.778 Tumoren aus 86 Tumorentitäten aus und dokumentierte TG1 außerdem in Normal- und Entzündungsgeweben; berichtete Prüfungen umfassten Western Blot, ELISA und Präabsorption mit TIGIT-Protein.
Dokumentierte manuelle und Leica-Bond-RX-Ausgangsprotokolle; unabhängige Studien berichten Dako Autostainer Link 48, Agilent Omnis und Fluoreszenz-Multiplex-IHC. Bedingungen sind im eigenen Labor zu validieren.
IHC-Bildgalerie und ONCOdianova-Referenzabbildungen: Abschnitt P·03 ↓
P·02 TIGIT-Antikörperklone
Immuncheckpoint-Proteine bieten vielversprechende Ansätze für die Krebstherapie. Krebszellen können zusammen mit Zellen aus der Mikroumgebung des Tumors die körpereigene Immunabwehr unterdrücken, indem sie lokal immunhemmende Komponenten heraufregeln. Der TIGIT-Signalweg spielt eine wichtige Rolle bei der Hemmung der Immunantwort und verknüpft verschiedene Immuncheckpoints. Die neuen immuntherapeutischen Ansätze setzen daher auf die Hemmung der TIGIT-Aktivität, insbesondere in Kombination mit weiteren Immuncheckpoint-Hemmern.
Der Immunrezeptor TIGIT (T-Zell-Immunrezeptor mit Ig- und ITIM-Domänen) gehört zur Familie der Poliovirus-Rezeptoren (PVR). TIGIT wird auf NK-Zellen, regulatorischen T-Zellen, follikulären T-Helferzellen, Gedächtnis-CD4+-T-Zellen und CD8+-T-Zellen exprimiert, aber nicht auf B-Zellen oder naiven CD4+-T-Zellen. TIGIT wirkt dabei auf einem hochkomplexen Weg als inhibitorischer Immuncheckpoint sowohl auf T-Zellen als auch auf natürliche Killerzellen (NK). Zu den bekannten Liganden für TIGIT gehören CD155 und CD112. Darüber hinaus interagiert das TIGIT/CD155/CD112- Netzwerk mit weiteren Checkpoint-Reglern.
Studien an Entzündungs- und Krebsmodellen zeigen, dass T-Zellen die TIGIT-Expression hochregulieren können. Auch die TIGIT-Liganden CD155 und CD112 werden auf dendritischen Zellen und Makrophagen bei verschiedenen Krebsarten stark exprimiert. Darüber hinaus korreliert die TIGIT-Expression stark mit der Expression anderer co-inhibitorischer Moleküle, einschließlich PD-1. Zusätzlich zur direkten Hemmung zytotoxischer T-Zellen kann TIGIT weitere Immunzellen beeinflussen, um eine immunsuppressive Tumorumgebung zu stimulieren. TIGIT bindet beispielsweise auf der Oberfläche dendritischer Zellen CD155 und hat einen Einfluss auf die Aktivität von NK-Zellen. Es sind zahlreiche Arzneimittel in der Entwicklung, die die Aktivität von TIGIT hemmen.
Der neu entwickelte Klon TG2 hat eine höhere Affinität zum Zielprotein TIGIT und zeigt in IHC-Vergleichsstudien mit Klon TG1 auf Tonsille eine stärkere Färbeintensität.
TG1 und TG2 sind eigenständige Klone mit eigenen Produktdaten und Katalognummern. Produktdaten und Publikationen zu TG2 stehen auf der TG2-Seite. Die an der NCBI-Quelle verifizierte TIGIT-Zellbiologie mit Klon TG1 an humanem FFPE-Gewebe steht unten im Abschnitt TIGIT in der Forschung.
Produktinformationen
P·03 IHC-Galerie
IHC-Abbildungen und Legenden zum TIGIT-Nachweis in verschiedenen Tumoren.
7 Abbildungen (10 Bilder) aus Tech Note V1 und Datenblatt V17 (Klon TG1): Tonsille in drei Vergrößerungen, Demaskierungsvergleich auf dem Leica Bond RX, Western Blot, Tonsille (Datenblatt), Hashimoto-Thyreoiditis, kolorektales Karzinom und Sarkoidgranulom.
Mikrofotografien der TG-1-Immunfärbung an humaner Tonsille bei 100×, 200× und 400× (ONCOdianova-Referenzabbildungen, Tech Note V1, Abb. 1).
Antikörperverdünnung 1:50 · Antigendemaskierung: Autoklav in TEC-Puffer (Tris-EDTA-Citrat, pH 7,8) bei 121 °C für 5 min · Zeiss-Axiocam-MRc-Kamera, AxioVision SE64, Zeiss Axioskop 40 · keine Bildverstärkung oder Manipulation.
Normale humane Tonsille mit zahlreichen TIGIT-positiven Lymphozyten (ONCOdianova-Referenzabbildung, Datenblatt V17, Abb. A).
Überschrift des Abbildungsblocks im Datenblatt: „Immunohistochemistry of human TG1 in routine formalin-fixed paraffin-embedded tissue samples“. Anderes Gesichtsfeld als die Tonsillenserie der Tech Note.
TIGIT-IHC an Tonsille nach hitzeinduzierter Epitopdemaskierung bei pH 9,0 (links) gegenüber pH 6,0 (rechts), Leica Bond RX (ONCOdianova-Referenzabbildungen, Tech Note V1, S. 5).
Das Signal bei pH 9,0 ist deutlich stärker als bei pH 6,0 – ein Demaskierungsvergleich bei zwei pH-Werten.
Western Blot mit rekombinantem TIGIT-Protein als Zielantigen für TG-1 (ONCOdianova-Referenzabbildung, Tech Note V1, Abb. 2). Ansteigende Mengen rekombinantes TIGIT (ng); Antikörper 1:500 in 5 % Milch/PBST; Bande bei ca. 20 kDa.
Belegt die Bindung des Antikörpers an das rekombinante Protein unter den genannten Bedingungen.
Entzündliches lymphoides Infiltrat bei Hashimoto-Thyreoiditis (ONCOdianova-Referenzabbildung, Datenblatt V17, Abb. C).
Gleiche Aufnahme und gleiche Legende wie Datenblatt V17, Abbildung C („Immunohistochemistry of human TG1 in routine FFPE tissue samples“); das Datenblatt zeigt einen Ausschnitt dieses Originals (1772 × 1181 px).
Tumorinfiltrierende Lymphozyten in einem kolorektalen Karzinom (ONCOdianova-Referenzabbildung, Datenblatt V17, Abb. B).
Als TIGIT-Signal gilt die membranöse Lymphozytenfärbung.
Sarkoidgranulom, durchsetzt von TIGIT-positiven Lymphozyten (ONCOdianova-Referenzabbildung, Datenblatt V17, Abb. D).
41 Fälle aus der ONCOdianova-TIGIT-Gewebegalerie. Sie dokumentieren TIGIT-positive Lymphozyten in normalem lymphatischem Gewebe, Schleimhaut und Tumoren verschiedener Organe.
Starke TIGIT-Expression in einer großen Zahl tumorinfiltrierender Lymphozyten in einem Seminom mit dichtem lymphozytärem Infiltrat.
Starke TIGIT-Expression in tumorinfiltrierenden Lymphozyten in einem Seminom mit spärlichem lymphozytärem Infiltrat.
Hoher Anteil TIGIT-positiver Zellen in peritumoralen Lymphozyten bei einem Peniskarzinom.
Niedriggradiges neuroendokrines Karzinom mit verstreutem Infiltrat TIGIT-positiver Lymphozyten.
Hochgradiges neuroendokrines Karzinom mit fokaler Ansammlung TIGIT-positiver Lymphozyten.
Dichtes peritumorales und intratumorales Infiltrat TIGIT-positiver Lymphozyten bei einem gering differenzierten Plattenepithelkarzinom des Ösophagus.
Hohe Frequenz TIGIT-positiver Lymphozyten in einem lymphoepithelialen Karzinom.
Dichtes peritumorales Infiltrat TIGIT-positiver Lymphozyten in einem Plattenepithelkarzinom des Larynx.
Invasives Urothelkarzinom mit dichtem peritumoralem und intratumoralem Infiltrat TIGIT-positiver Lymphozyten.
TIGIT-IHC, Übersicht und Detail.
Hohe Frequenz TIGIT-positiver Lymphozyten in einem Hodgkin-Lymphom.
TIGIT-positive Lymphozyten im peritumoralen und intratumoralen lymphozytären Infiltrat eines Plattenepithelkarzinoms der Lunge.
Hohe Frequenz TIGIT-positiver intratumoraler Lymphozyten in einem Plattenepithelkarzinom der Lunge.
TIGIT-positive Lymphozyten liegen peritumoral, nicht intratumoral, in einem Plattenepithelkarzinom.
Spärliche TIGIT-positive Lymphozyten in einem Plattenepithelkarzinom der Lunge mit ausgeprägter desmoplastischer Reaktion.
Hohe Dichte TIGIT-positiver Lymphozyten in einem Plattenepithelkarzinom der Lunge.
TIGIT-positive Lymphozyten in einem bronchioloalveolären Karzinom der Lunge.
Hohe Frequenz TIGIT-positiver Lymphozyten in einem Adenokarzinom der Lunge.
Hohe Frequenz peritumoraler TIGIT-positiver Lymphozyten in einem großzelligen Adenokarzinom der Lunge.
Zahlreiche TIGIT-positive Lymphozyten in einem Adenokarzinom der Ampulla Vateri.
Hohe Zahl TIGIT-positiver Lymphozyten in einem Angiosarkom.
Häufige TIGIT-positive Lymphozyten in einem Liposarkom.
Zahlreiche TIGIT-positive Lymphozyten in einem Warthin-Tumor.
Dichte Infiltration eines Ovarialkarzinoms durch TIGIT-positive Lymphozyten.
Plattenepithelkarzinom der Cervix uteri mit zahlreichen intratumoralen TIGIT-positiven Lymphozyten.
Plattenepithelkarzinom der Cervix uteri mit peritumoralem und intratumoralem Infiltrat TIGIT-positiver Lymphozyten.
Plattenepithelkarzinom der Cervix uteri mit reichlichem intratumoralem Infiltrat TIGIT-positiver Lymphozyten.
Plattenepithelkarzinom der Cervix uteri mit hoher Zahl intratumoraler TIGIT-positiver Lymphozyten.
Peritumorale TIGIT-positive Lymphozyten bei einem Endometriumkarzinom.
Hohe Dichte TIGIT-positiver Lymphozyten in einem medullären Mammakarzinom.
Medulläres Mammakarzinom mit zahlreichen TIGIT-positiven Lymphozyten.
Hohe Dichte peritumoraler und intratumoraler TIGIT-positiver Lymphozyten in einem medullären Mammakarzinom.
TIGIT-positive Lymphozyten im subepithelialen Gewebe der Lippe (orales Epithel).
Mundschleimhaut mit TIGIT-positiven Lymphozyten im subepithelialen Stroma.
Mundschleimhaut mit intraepithelialen und subepithelialen TIGIT-positiven Lymphozyten.
Zahlreiche TIGIT-positive Lymphozyten in der Milz.
TIGIT-positive Lymphozyten sind im Thymus häufig.
Thymus mit hoher Zahl TIGIT-positiver Lymphozyten.
TIGIT-positive Lymphozyten sind in der Appendixschleimhaut zahlreich.
Appendixschleimhaut mit dichter Ansammlung TIGIT-positiver Lymphozyten.
Appendixschleimhaut mit TIGIT-positiven Lymphozyten.
Übersicht links, Detail rechts.
Alle Bilder und Legenden sind Originalmaterial von ONCOdianova. Die Referenzabbildungen sind die Abbildungen der Tech Note V1 und des Datenblatts V17; sie dokumentieren die Färbung mit Klon TG1 unter den genannten Bedingungen. Die TIGIT-Gewebegalerie veranschaulicht die Gewebe, die mit der Anti-TIGIT-Immunhistochemie von ONCOdianova untersucht wurden.
P·04 Datenblatt · Tech Note · MSDS
Produktdaten, Anwendungshinweise, Referenzen und Abbildungen A–D.
PDF herunterladen ↓Manuelles und Leica-Bond-RX-Färbeverfahren, Tonsille (100×/200×/400×), Demaskierungsvergleich und Western-Blot-Abbildung.
PDF herunterladen ↓Sicherheitsdatenblatt.
PDF herunterladen ↓P·05 Description
| Produkt | Anti-TIGIT (Human) aus Maus |
|---|---|
| Katalognummer | DIA-TG1-M (frühere Ausführung desselben Klons: DIA-TG1, 200 µg) |
| Katalognummer Vertrieb | ODN-DIA-TG1-M (BIOZOL) |
| SKU | TIGIT |
| Produktkategorie | Cancer Immunology IHC marker |
| Spezifität | TIGIT |
| Target | TIGIT — T-cell immunoreceptor with Ig and ITIM domains (Gene ID 201633, UniProt Q495A1) |
| Speziesreaktivität | Human |
| Wirtsspezies | Mouse |
| Isotyp | Mouse IgG1/κ |
| Klon | TG1 (monoklonal) |
| RRID | AB_3750391 |
| Immunogen | Rekombinantes Peptid aus der extrazellulären Domäne des humanen TIGIT |
| Anwendungen | IHC an FFPE-Gewebe; Western Blot |
| Konjugation | unkonjugiert |
| IHC-Ausgangsbereich | 1:50 – 1:150 — 1:50 bei Biotin/(Strept)Avidin-basierter Detektion, 1:100–1:150 bei Polymer-basierter Detektion; die optimale Verdünnung ist vom Anwender für Gewebe, Fixierung, Plattform und Detektionssystem zu bestimmen |
| Format | Lyophilisiert; gereinigter Antikörper aus Kulturüberstand |
| Menge | 100 µl |
| Rekonstitution | Mit sterilem Aqua dest. auf 100 µl auffüllen; 10 Minuten vorsichtig schütteln |
| Puffer / Formulierung | PBS, pH 7,4, 2 % BSA, 0,05 % Natriumazid |
| BSA-freie Variante | BSA-freie, hochkonzentrierte Variante auf Anfrage |
| Epitopdemaskierung | Hitzeinduzierte Epitopdemaskierung erforderlich; empfohlen: Autoklav 121 °C, 5 min, Tris-EDTA-Citrat pH 7,8 |
| Positivkontrolle | Tonsille |
| Färbemuster | Membranös (Lymphozytensubtypen) |
| Lagerung | Lyophilisat bei 2–8 °C; langfristig bei −20 °C (mindestens ein Jahr stabil); rekonstituiert kurzfristig bei 2–8 °C (mehrere Wochen); wiederholtes Einfrieren und Auftauen vermeiden |
| Assoziierte Antikörper | DIA-TG2-M (Anti-TIGIT, Klon TG2) · DIA-R12 (Anti-PVRIG/CD112R, Klon R12) — laut Datenblatt |
| Anwendungshinweis | Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren. |
| Hersteller | ONCOdianova GmbH |
Die technischen Angaben dieser Tabelle stammen aus Datenblatt V17 (25.02.2025) und Tech Note V1 (11/2019). RRID-, Gen- und Protein-Einträge verweisen auf ihre Register; publizierte Färbebedingungen sind im Abschnitt Publikationen mit Quelle dokumentiert. Die Angaben gelten für das aktuelle Produkt DIA-TG1-M (100 µl). Publizierte Verdünnungen reichen je nach Studie und Verfahren von 1:25 bis 1:150; jedes Labor validiert seine eigenen Bedingungen.
P·06 Reaktivität
Der Klon TG1 ist der erste monoklonale Antikörper, der TIGIT in standardmäßig Formalin-fixierten und Paraffin-eingebetteten (FFPE) Geweben nachweist. TG1 wurde für den Nachweis TIGIT-positiver T-Zellen validiert, mit Schwerpunkt auf tumorinfiltrierenden T-Zellen (TILs). Der Anti-TIGIT-Klon TG1 ermöglicht die Identifizierung von TIGIT in der Tumormikroumgebung unter pathologischen Bedingungen.
TIGIT (T-Zell-Immunrezeptor mit Ig- und ITIM-Domänen) gehört zur Familie der Poliovirus-Rezeptoren (PVR). TIGIT wird auf Untergruppen von T-Lymphozyten exprimiert und steuert einen Immuncheckpoint. Die Expression von TIGIT wurde auf NK-Zellen, regulatorischen T-Zellen, follikulären T-Helferzellen, Gedächtnis-CD4+-T-Zellen und CD8+-T-Zellen berichtet, nicht jedoch auf B-Zellen oder naiven CD4+-T-Zellen. Naive CD4+-T-Zellen können die TIGIT-Expression nach Aktivierung hochregulieren. In vielen verschiedenen Krebsmodellen wurde gezeigt, dass TIGIT auf T-Zellen hochreguliert wird. Die Liganden CD155 und CD112 werden bei verschiedenen Krebserkrankungen ebenfalls stark auf dendritischen Zellen und Makrophagen exprimiert. Darüber hinaus korreliert die TIGIT-Expression stark mit der Expression weiterer co-inhibitorischer Moleküle wie PD-1. Zusätzlich zu seiner direkten hemmenden Wirkung auf zytotoxische T-Zellen kann TIGIT eine immunsuppressive Mikroumgebung fördern, indem es andere Immunzellen beeinflusst: TIGIT kann zum Beispiel CD155 auf der Oberfläche dendritischer Zellen binden oder die Aktivität von NK-Zellen beeinflussen. Arzneimittel, die TIGIT hemmen, befinden sich derzeit in der Entwicklung. Die immunhistochemische (IHC) Anwendung des monoklonalen Antikörpers TG1 kann wertvolle Hinweise für die klinische Forschung und für mögliche therapeutische Interventionen liefern, die gezielt an TIGIT als Checkpoint der Tumorimmunologie ansetzen.
Der Klon TG1 ist der erste monoklonale Antikörper für den immunhistochemischen (IHC) Nachweis von TIGIT (T-Zell-Immunrezeptor mit Ig- und ITIM-Domänen) in standardmäßig Formalin-fixierten und Paraffin-eingebetteten Gewebeproben. TG1 wurde auf zahlreichen Tumoren für den IHC-Nachweis TIGIT-positiver T-Zellen in der Tumormikroumgebung validiert. Histologische Studien mit TG1 an Tumorgeweben können wertvolle Hinweise für die klinische Forschung und für therapeutische Interventionen liefern, die am TIGIT-Tumorimmunologie-Checkpoint ansetzen.
| Speziesreaktivität | Human |
|---|---|
| Wirtsspezies | Maus |
| Mit TG1 in FFPE-Gewebe nachgewiesen | CD8+ zytotoxische T-Zellen, CD4+ T-Helferzellen, FOXP3+ regulatorische T-Zellen und NK-Zellen |
| Positivkontrolle | Tonsille |
| Färbemuster | Membranös, Lymphozytensubtypen |
| Anwendungen | IHC an humanem FFPE-Gewebe; Western Blot |
P·07 IHC-Protokolle & publizierte Anwendungen
ONCOdianova-Anwendungsprotokoll
Manuelle FFPE-IHC — ONCOdianova-Protokoll
Quelle: ONCOdianova Technical Note V01 „Anti-TIGIT / DIA-TG1 · Klon TG1“ — vollständiges Dokument unter Dokumente. Das automatisierte Leica-Bond-RX-Verfahren derselben Technical Note steht getrennt in Verfahren 2.
Begutachtet · mit ONCOdianova-Beteiligung
Publizierte Hellfeld-IHC-Anwendung — Seminom
Hinsch A. et al., Oncol Lett 2019;18(2):1497–1502 · doi:10.3892/ol.2019.10428
Begutachtet · mit Dianova-Beteiligung
Publizierte Multiplex-Fluoreszenz-IHC
Blessin N.C. et al., Dis Markers 2019:5160565 · doi:10.1155/2019/5160565 — dieselbe Arbeit nennt für das Hellfeldverfahren pH 7,8 und 1:70; die Multiplexwerte gelten nicht für das Hellfeldverfahren.
Unabhängige Drittanwendung
Publizierte Anwendung — Leica BOND-III
Murakami D. et al., PLOS ONE 2022;17(3):e0265908 · doi:10.1371/journal.pone.0265908 — von der Forschungsgruppe berichtete Anwendung, keine Protokollempfehlung von ONCOdianova.
Unabhängige Drittanwendung
Publizierte Anwendung — Melanomforschung
Niebel D. et al., Clin Epigenetics 2022;14:50 · doi:10.1186/s13148-022-01270-2 — von der Forschungsgruppe berichtete Anwendung, keine Protokollempfehlung von ONCOdianova.
Die dargestellten Protokolle und publizierten Workflows sind dokumentierte Anwendungsbeispiele. Antikörperverdünnung, Antigendemaskierung, Detektionschemie und Färbebedingungen können eine laborspezifische Optimierung und Validierung erfordern.
Dokumentierte Ausgangsprotokolle. Beide Verfahren stammen aus der Tech Note V1 (November 2019) zum Klon TG1. Die dort genannte Stammkonzentration von 0,4 mg/ml und die Rekonstitution in 500 µl gehören zum Format DIA-TG1 (200 µg); DIA-TG1-M (100 µl) wird in 100 µl rekonstituiert. Die Verdünnungen 1:50 – 1:150 sind Ausgangswerte; jedes Labor validiert Gewebe, Fixierung, Plattform und Detektion selbst.
* TBST-Waschpuffer (#K8000, DAKO)
** 5 min inkubieren, nachdem der Autoklav 121 °C erreicht hat
*** TEC-Stammlösung = 20× Tris-EDTA-Citrat-Puffer: pro 1 l Aqua dest. 5 g Trizma Base (Sigma T 1503), 10 g EDTA (Merck 1.08418.0250), 6,4 g Trinatriumcitrat (Sigma C 0909) lösen; mit 1 mol/l HCl auf pH 7,8 einstellen
Laut Datenblatt V17 wurde ein automatisiertes Protokoll auf dem Leica Bond RX etabliert. Unabhängige Publikationen dokumentieren zusätzlich den Einsatz auf Dako Autostainer Link 48 und Agilent Omnis (siehe Publikationen).
Dispensiervolumen laut Tech Note 150 µl je Schritt. Die Tech Note zeigt zusätzlich eine Tonsillenfärbung im Vergleich HIER pH 9,0 gegen pH 6,0 mit deutlich stärkerem Signal bei pH 9,0 – siehe Referenzabbildung „Bond RX, HIER pH 9,0 / pH 6,0“ in der IHC-Galerie (P·03).
P·08 Referenzen
Die zwölf Referenzen dokumentieren die TIGIT-Immunhistochemie an humanem Gewebe. Elf davon verwendeten Klon TG1 (DIA-TG1); Scimeca et al. 2019 wird im ONCOdianova-Datenblatt V17 unter „References for clone TG1“ geführt. Ein im Publikationstitel genannter Biomarker ist Gegenstand der jeweiligen Studie, kein ONCOdianova-Produkt. Publizierte Plattform- und Verdünnungsangaben belegen die jeweilige wissenschaftliche Verwendung. AACR-Kongressbeiträge sind im AbschnittKongressbeiträge dokumentiert.
P·09 Leitfaden zur Interpretation
Dokumentiert ist eine membranöse Färbung verschiedener Lymphozytensubtypen. Tonsille ist die dokumentierte Positivkontrolle; in der publizierten TMA-Studie wurde TIGIT in CD8+-, CD4+- und FOXP3+-T-Zellen sowie NK-Zellen nachgewiesen, nicht aber in B-Zellen, Makrophagen oder dendritischen Zellen.[1]
Tonsille ist die dokumentierte Positivkontrolle für TG1; Datenblatt V17 und Tech Note V1 nennen sie für das manuelle und für das automatisierte Verfahren. Als TIGIT-Positivität gilt die membranöse Lymphozytenfärbung; Positiv- und Negativkontrollen parallel mitführen.
Western Blot, ELISA und Präabsorption sind als Spezifitätsprüfungen berichtet,[1] die Bindung an rekombinantes TIGIT ist dokumentiert.
P·10 Target-Hintergrund
TIGIT (T-cell immunoreceptor with Ig and ITIM domains; auch VSTM3, VSIG9) ist ein inhibitorischer Rezeptor der Poliovirus-Rezeptor/Nectin-Familie. Nach Bindung seiner Liganden CD155 (PVR) und CD112 (Nectin-2), die auf antigenpräsentierenden Zellen exprimiert werden, vermittelt er hemmende Signale an T-Zellen und NK-Zellen (UniProt Q495A1).
In humanem FFPE-Gewebe, das mit Klon TG1 untersucht wurde, fand sich TIGIT in CD8+-zytotoxischen T-Zellen, CD4+-T-Helferzellen, FOXP3+-regulatorischen T-Zellen und NK-Zellen, nicht aber in CD11c+ dendritischen Zellen, CD68+-Makrophagen oder CD20+-B-Lymphozyten. Die TIGIT-Expression verlief parallel zu PD-1: mehr als 70 % der TIGIT+-Zellen waren PD-1+, und mehr als 90 % der PD-1+-Zellen waren TIGIT+. In der Tonsille nahm die Expression vom interfollikulären Bereich zum Keimzentrum hin zu; unter den entzündlichen Erkrankungen war das Signal bei Hashimoto-Thyreoiditis am stärksten.[1]
TIGIT+-Lymphozyten fanden sich in allen 86 untersuchten Tumorentitäten, mit erheblicher Variabilität innerhalb und zwischen den Entitäten und besonders hohen Dichten in Plattenepithelkarzinomen verschiedener Herkunft.[1] Beim Hodgkin-Lymphom waren 9–99 % (Median 86 %) der lymphoiden Hintergrundzellen TIGIT+, wobei TIGIT und PD-1 in denselben Zellen lokalisierten.[2]TIGIT wird deshalb als inhibitorischer Checkpoint-Rezeptor des Tumormikromilieus erforscht. Klon TG1 ist ein Forschungswerkzeug für solche Studien.
Zahlen in eckigen Klammern verweisen auf die Publikationsliste unten. Targetbiologie und klonspezifische Produktaussagen bleiben getrennt.
P·11 Translationale Forschungsrelevanz
TIGIT ist ein inhibitorischer Immuncheckpoint-Rezeptor und ein therapeutisch untersuchtes Target. Die TIGIT-Expression im Gewebe wurde per Hellfeld- und Multiplex-IHC und in unabhängigen Studien im Zusammenhang mit der Immunkontextur des Tumors und dem Ansprechen unter Anti-PD-1-Therapie analysiert.
Mit dem Klon TG1 lassen sich TIGIT-positive Lymphozyten in humanem FFPE-Gewebe untersuchen — per Hellfeld-IHC, auf automatisierten Plattformen und in der Fluoreszenz-Multiplex-IHC; er ist durch zwölf begutachtete Referenzen dokumentiert, darunter eine systematische Studie an 1.778 Tumoren aus 86 Entitäten.
TG1 ist ein Forschungsantikörper zur Untersuchung TIGIT-positiver Lymphozyten in humanem FFPE-Gewebe. Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren.
P·12 AACR-Kongressbeiträge
Drei Posterbeiträge zu TIGIT vom Annual Meeting der American Association for Cancer Research (AACR), Chicago, stehen als Original-PDFs zum Download bereit.
„Prevalence of TIGIT expression in normal tissues, inflammation, and cancer.“ Blessin NC et al., Institut für Pathologie, Universitätsklinikum Hamburg-Eppendorf; Dianova GmbH, Hamburg.
PDF herunterladen ↓„High variability of TIGIT expression in Hodgkin’s lymphoma.“ Simon R et al., Institut für Pathologie, Universitätsklinikum Hamburg-Eppendorf; Dianova GmbH, Hamburg.
PDF herunterladen ↓„Expression and Significance of PVR-TIGIT/CD226, An Immune Checkpoint Axis in Small Cell Lung Cancer.“ Yu H et al.; Daten bereitgestellt vom Hirsch Biomarker Analysis Laboratory, Anschutz Medical Campus, University of Colorado Denver, Aurora, CO, USA.
PDF herunterladen ↓Die zugehörigen Meldungen stehen im wissenschaftlichen Archiv.
P·13 FAQ
TG1 ist ein monoklonaler Mausantikörper gegen humanes TIGIT (Katalognummer DIA-TG1-M) und wird als Forschungsreagenz eingesetzt. Klonspezifisch publizierte Anwendungen umfassen IHC an FFPE-Gewebe, Brightfield-IHC und Fluoreszenz-Multiplex-IHC.
Ja. Mehrere begutachtete Publikationen nennen TG1 oder DIA-TG1 ausdrücklich und dokumentieren den Einsatz an humanem FFPE-Material.
Für die IHC gilt ein Ausgangsbereich von 1:50 bis 1:150 (1:50 bei Biotin/Streptavidin-basierter Detektion, 1:100 bis 1:150 bei Polymer-basierter Detektion). Publizierte Bedingungen reichen je nach Studie und Verfahren von 1:25 bis 1:150. Jedes Labor muss die optimale Bedingung für sein eigenes Verfahren validieren.
Eine hitzeinduzierte Epitopdemaskierung ist erforderlich. Empfohlen ist eine stringente Hitzevorbehandlung im Autoklav bei 121 °C für 5 Minuten in Tris-EDTA-Citrat-Puffer, pH 7,8 (TEC-Puffer); das dokumentierte Leica-Bond-RX-Protokoll verwendet eine High-pH-Demaskierung (ER2, pH 9,0, 100 °C, 20 min).
Ja. Ein Leica-Bond-RX-Protokoll ist in Tech Note V1 dokumentiert. Unabhängige begutachtete Studien berichten zusätzlich den Einsatz auf dem Dako Autostainer Link 48 und Agilent Omnis. Die Bedingungen aus diesen Quellen sind Ausgangspunkte und müssen im eigenen Labor validiert werden.
TG1 färbt die Zellmembranen verschiedener Lymphozytensubtypen; dieses membranöse Signal gilt als TIGIT-Positivität. Tonsille ist die empfohlene Positivkontrolle und wird parallel mit einer Negativkontrolle mitgeführt.
Ja. TG1 wurde in begutachteten Studien in Fluoreszenz-Multiplex-IHC verwendet. Die publizierten Bedingungen gelten für die jeweiligen Versuchsaufbauten und müssen bei Übertragung auf andere Systeme erneut optimiert werden.
TG1 und TG2 sind zwei getrennte monoklonale Maus-Hybridomklone gegen humanes TIGIT mit eigenen Katalognummern (DIA-TG1-M und DIA-TG2-M). TG1 ist der klonspezifisch publizierte Klon: Für ihn sind zwölf begutachtete Referenzen dokumentiert, und er trägt die RRID AB_3750391. TG2 ist durch ein eigenes Datenblatt dokumentiert und zeigt eine höhere Affinität, stärkere Tonsillen-Färbeintensität und höhere Verdünnbarkeit im Vergleich zu TG1 (dokumentiert auf der TG2-Seite).
Für Klon TG1 sind zwölf begutachtete Referenzen dokumentiert — zu lymphatischem Gewebe, Entzündung und Krebs (Blessin 2019), Hodgkin-Lymphom (Li 2018; Annibali 2021), Seminom (Hinsch 2019), Gallenblasenkarzinom (Albrecht 2021), nicht-kleinzelligem Lungenkarzinom (Mori 2023), kutanem Plattenepithelkarzinom und Keratoakanthom (Lonsdorf 2024), Merkelzellkarzinom (Toberer 2025), kolorektalem Karzinom (Murakami 2022), Melanom (Niebel 2022), Uveamelanom (Koch 2025) und Prostatakarzinom (Scimeca 2019). Elf davon verwendeten Klon TG1 (DIA-TG1); Scimeca et al. 2019 wird im ONCOdianova-Datenblatt V17 unter „References for clone TG1“ geführt. Die vollständige Liste mit DOI und PMID steht im Publikationsabschnitt dieser Seite.
Humane Tonsille. Tonsille ist die dokumentierte Positivkontrolle; eine publizierte Studie verwendete zusätzlich Tonsillen-Keimzentren als Positivkontrolle auf einer automatisierten Plattform.
Ein membranöses Färbemuster verschiedener Lymphozytensubtypen. In der publizierten TMA-Studie wurde TIGIT mit TG1 in CD8+-, CD4+- und FOXP3+-T-Zellen sowie NK-Zellen nachgewiesen, nicht aber in B-Zellen, Makrophagen oder dendritischen Zellen.
Ja. Die Research Resource Identifier lautet AB_3750391 und ist dem Produkt DIA-TG1-M, Klon TG1, zugeordnet.
P·14 Bestellung
Bestellung. ONCOdianova-Produkte werden über unseren Vertriebspartner BIOZOL Diagnostica Vertrieb GmbH, Oehleckerring 11–13, 22419 Hamburg, bezogen — Bestellanfragen per E-Mail: order@biozol.de (CC info@oncodianova.com). Siehe auch Bestellinformationen.
Datenblatt V17 (25.02.2025) ist das aktuelle Datenblatt für DIA-TG1-M (100 µl). Das in den historischen Dokumenten genannte Format DIA-TG1 (200 µg) ist die Vorgängerausführung desselben Klons. Verwandt: TG2 (eigenständiger anti-TIGIT-Klon) · R12 (CD112R/PVRIG) · KK3 (CD73/NT5E) · TC8 (CD8) · FX3 (FOXP3).