Was erkennt der Anti-FOXP3-Klon FX3?
FX3 ist ein monoklonaler Mausantikörper (IgG2a/κ), der gegen ein rekombinantes Peptid des humanen FOXP3 (Forkhead-Box-Protein P3; Gen FOXP3) erzeugt wurde. Er wird als Forschungsreagenz für die Immunhistochemie an humanem formalinfixiertem, paraffineingebettetem (FFPE) Gewebe angeboten – für die Hellfeld-IHC und die Fluoreszenz-Multiplex-IHC – und zeigt ein nukleäres Färbemuster.
Ist FX3 für die FFPE-Immunhistochemie dokumentiert?
Ja. Klon FX3 wurde für den Nachweis von FOXP3 in routinemäßig formalinfixiertem, paraffineingebettetem Gewebe entwickelt; das Datenblatt nennt einen Ausgangsbereich von 1:100 bis 1:200 (IHC-P). ONCOdianova-Abbildungen zeigen die nukleäre FOXP3-Färbung in Tonsille, kolorektalem Adenokarzinom, high-grade serösem Ovarialkarzinom und weiteren soliden Karzinomen.
Gibt es begutachtete Publikationen mit Klon FX3?
Ja. Picard et al., Acta Neuropathologica 2023 (PMID 37656187) setzten DIA-FX3 mit 1:200 in einem automatisierten Sechs-Marker-Multiplex-Immunfluoreszenzpanel (Opal-Polaris-7-Farben-Kit) an humanen FFPE-Schnitten pilozytischer Astrozytome ein.
Ist FX3 für die Fluoreszenz-Multiplex-IHC validiert?
Ja. Der Klon FX3 wurde für Fluoreszenzmultiplex-IHC-Studien der Ausprägung von FOXP3 in menschlichen Geweben entwickelt und validiert (ONCOdianova-Produktinformation und Datenblatt), und die Galerie zeigt die FOXP3 × CD112R/PVRIG-Mehrfarben-Immunfluoreszenz normaler Tonsille. Publizierte Anwendung: Picard et al. 2023 setzten DIA-FX3 in einem automatisierten Opal-Multiplexpanel ein. Jedes neue Panel sollte für Gewebe, Antikörperreihenfolge, Demaskierung, Verdünnung und Detektion verifiziert werden.
Welche Verdünnung ist ein geeigneter Ausgangspunkt für FX3?
Das Datenblatt empfiehlt 1:100 bis 1:200 (IHC-P) an FFPE-Schnitten; das manuelle ONCOdianova-Protokoll verwendet 1:100. Die publizierte Multiplexstudie setzte 1:200 innerhalb eines Opal-Panels ein – eine studienspezifische Bedingung. Die optimale Verdünnung sollte vom Anwender für Gewebe, Fixierung, Plattform und Detektionssystem bestimmt werden.
Welche Epitopdemaskierung benötigt FX3?
Eine hitzeinduzierte Epitopdemaskierung ist erforderlich. Das Datenblatt empfiehlt den Autoklav bei 121 °C für 5 Minuten in Tris-EDTA-Citrat-Puffer, pH 7,8 (TEC-Puffer).
Welche Positivkontrolle und welches Färbemuster sind für FX3 dokumentiert?
Humane Tonsille mit nukleärem Färbemuster FOXP3-positiver Lymphozyten. Das Datenblatt nennt Tonsille als Positivkontrollgewebe und „nuclear“ als Visualisierung; die Galerie enthält eine Tonsillenübersicht und FOXP3 × CD112R/PVRIG-Multiplexaufnahmen normaler Tonsille.
Wie können FOXP3-positive Zellen in der Gewebeforschung ausgewertet werden?
FX3 visualisiert nukleäres FOXP3-Protein in FFPE-Gewebe. Abhängig von der Forschungsfrage können FOXP3-positive Zellen zusammen mit Morphologie, Gewebekompartiment und ergänzenden Immunmarkern ausgewertet werden.
Was ist der dokumentierte Validierungsumfang des Klons FX3?
Klon FX3 wurde für den Nachweis von FOXP3 in routinemäßigem FFPE-Gewebe entwickelt, an zahlreichen Gewebeproben charakterisiert und für Fluoreszenzmultiplex-IHC-Studien der Ausprägung von FOXP3 in menschlichen Geweben validiert; er weist FOXP3-positive TILs in menschlichen FFPE-Tumoren nach (ONCOdianova-Produktinformation). Publizierte klonspezifische Anwendung: automatisierte Multiplex-Immunfluoreszenz an humanem FFPE-Gewebe mit DIA-FX3 1:200 (Picard et al. 2023).
Kann FX3 auf automatisierten Färbeplattformen eingesetzt werden?
Ja. Das Datenblatt gibt an, dass der Antikörper für die immunhistochemische Färbung auf automatisierten Plattformen geeignet ist, und die ONCOdianova-Produktinformation nennt ihn für automatisierte Färbeverfahren anwendbar. Picard et al. 2023 führten ihre Multiplexfärbung mit DIA-FX3 auf dem automatisierten LabSat™-Gerät durch.